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RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

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線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的檢測(cè),保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗(yàn)室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問(wèn)題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對(duì)極個(gè)別客戶溶解問(wèn)題和轉(zhuǎn)染效率問(wèn)題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價(jià)比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定適合檢測(cè)時(shí)間。

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因?

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對(duì)復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么

如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:

1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。

2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。

3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。

歡迎咨詢PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。專業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣除外)。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無(wú)線標(biāo)簽機(jī)。

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運(yùn)河區(qū)烤漆門(mén)頭美觀

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門(mén)頭 等 62 人贊同該回答

門(mén)頭藝術(shù)是一種獨(dú)特的藝術(shù)形式,它以門(mén)頭為載體,通過(guò)雕刻、繪畫(huà)、裝飾等方式,將傳統(tǒng)文化與現(xiàn)代藝術(shù)相結(jié)合,創(chuàng)造出獨(dú)具特色的門(mén)頭藝術(shù)作品。門(mén)頭藝術(shù)在我國(guó)有著悠久的歷史,它不僅是建筑的一部分,更是城市文化的重 。

四川圓錐形頂針廠家
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第1樓
電磁 等 24 人贊同該回答

電磁式頂針廣泛應(yīng)用于數(shù)控機(jī)床、加工中心、自動(dòng)化生產(chǎn)線等領(lǐng)域,主要用于夾緊工件,保證工件的穩(wěn)定性和精度。電磁式頂針具有夾緊力大、夾緊精度高、響應(yīng)速度快、使用壽命長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn),可以滿足高精度加工的需求。同時(shí), 。

黑龍江維生素BT測(cè)定用左旋肉堿測(cè)定用試劑HEPES
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第2樓
精密 等 49 人贊同該回答

精密度本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行精密度驗(yàn)證,選取1個(gè)嬰幼兒配方奶粉樣品進(jìn)行7次重復(fù)性測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果表明:經(jīng)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)得到的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.77%,符合GB/T27417—2017)的要求。2.4回收率本實(shí)驗(yàn) 。

安徽印刷廢氣處理設(shè)備旋流板塔
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第3樓
在廢 等 16 人贊同該回答

在廢氣處理行業(yè),我們判斷一個(gè)企業(yè)適合使用什么廢氣處理設(shè)備的重要因素就是風(fēng)量,但是很多企業(yè)都不知道如何計(jì)算自己的風(fēng)量,我們就以催化燃燒裝置為例,跟大家探討下如何計(jì)算催化燃燒裝置的風(fēng)量。噴漆房催化燃燒設(shè)備 。

下城區(qū)銑床五金件加工電話
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第4樓
沖壓 等 67 人贊同該回答

沖壓五金件加工工藝的基本要求:1汽車五金件加工定制中使用的材料。硬件沖壓件不符合設(shè)計(jì)產(chǎn)品的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),還要符合沖壓工藝和沖壓后加工的要求(如切割加工).電鍍.焊接等)。2.在設(shè)計(jì)零件的結(jié)構(gòu)形狀時(shí),可使用 。

杭州漁業(yè)液壓絞盤(pán)廠家直銷
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第5樓
液壓 等 67 人贊同該回答

液壓石油機(jī)械價(jià)格百銷通會(huì)員誠(chéng)信認(rèn)證所有地區(qū)所有地區(qū)華東華北華中華南西北西南北京天津河北石家莊市滄州市衡水市山西太原市上海江蘇蘇州市泰州市淮安市鹽城市浙江寧波市溫州市麗水市福建廈門(mén)市江西新余市山東濟(jì)南市 。

深圳薄壁不銹鋼管規(guī)格
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第6樓
不銹 等 76 人贊同該回答

不銹鋼毛細(xì)管特性: 具有良好的柔軟性、耐蝕性、耐高溫、耐磨損、抗拉性、防水性并提供優(yōu)良的電磁屏蔽性能。不銹鋼軟管能自由地彎曲成各種角度和曲率半徑,在各個(gè)方向上均有同樣的柔軟性和耐久性;不銹鋼軟管節(jié)距之 。

佛山ATMP推薦廠家
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第7樓
阻垢 等 86 人贊同該回答

阻垢劑ATMP氨基三亞甲基膦酸作用機(jī)理:1、阻垢劑中的絡(luò)和增溶作用共聚物溶于水后發(fā)生電離生成帶負(fù)電性的分子鏈,它與Ca2+形成可溶于水的絡(luò)合物或螯合物,從而使無(wú)機(jī)鹽溶解度增加,起到阻垢作用。2、晶格畸 。

貴州水泵筒式永磁變速器變頻
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第8樓
筒式 等 16 人贊同該回答

筒式永磁調(diào)速器是一種電機(jī)調(diào)速器,相比其他調(diào)速器,它具有以下優(yōu)點(diǎn):高效節(jié)能:筒式永磁調(diào)速器可以根據(jù)負(fù)載情況自動(dòng)調(diào)整電機(jī)的轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)矩,從而提高電機(jī)的效率和能耗,實(shí)現(xiàn)節(jié)能減排。穩(wěn)定可靠:筒式永磁調(diào)速器可以通 。

江蘇有機(jī)硅
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第9樓
由于 等 32 人贊同該回答

由于有機(jī)硅獨(dú)特的結(jié)構(gòu),兼?zhèn)淞藷o(wú)機(jī)材料與有機(jī)材料的性能,具有表面張力低、粘溫系數(shù)小、壓縮性高、氣體滲透性高等基本性質(zhì),并具有耐高低溫、電氣絕緣、耐氧化穩(wěn)定性、耐候性、難燃、憎水、耐腐蝕、無(wú)毒無(wú)味以及生理 。

福建志愿服務(wù)小程序開(kāi)發(fā)定制
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第10樓
山東 等 29 人贊同該回答

山東安居科技軟件開(kāi)發(fā)公司是一家專注于為各單位提供定制化軟件解決方案的高科技企業(yè)。我們深知每個(gè)單位的需求和特點(diǎn)都不盡相同,因此我們提供了一系列個(gè)性化的小程序開(kāi)發(fā)服務(wù),以滿足不同客戶的需求。我們的小程序開(kāi) 。

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